大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出b-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被b-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)b-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落。pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖。據(jù)圖回答下列問題:
圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入()等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。
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人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá),說明人和牛()。
基因工程操作的基本步驟是:①();②();③();④()。
從圖中可見,mRNA1和mRNA2的結(jié)合直接導(dǎo)致了()無法合成,最終使番茄獲得了抗軟化的性狀。
在獲得目的基因的過程中,PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種()、四種脫氧核苷酸和()的DNA聚合酶。
④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基?理由是什么?
在番茄新品種的培育過程中,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法叫做()。
獲取目的基因途徑有()、()。
導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么?
在外源基因?qū)胄∈蟮腁細(xì)胞時,外源基因可能隨機(jī)地插入到該細(xì)胞的DNA中。這些細(xì)胞有的能發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠,有的卻死亡。請分析外源基因插入后導(dǎo)致有些A細(xì)胞死亡的最可能原因()。
若要獲得抗病基因,能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應(yīng)的位點進(jìn)行切割?說明理由。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒?