質(zhì)粒的提取是基因工程中至關(guān)重要的一步。在眾多質(zhì)粒提取方法中,堿裂解法最為常用。其實(shí)驗(yàn)步驟如下:
1.加1.5mL培養(yǎng)的菌液于離心管中,12000rpm離心30s。
2.去上清,加入冰的200μL溶液I,劇烈震蕩,室溫放置3min。
3.加入300μl溶液II,顛倒數(shù)次,冰浴3min。
4.加入冰的400μl溶液III,輕輕顛倒混勻,冰浴5min,12000rpm離心5min。
5.過(guò)柱純化……某同學(xué)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察到加入溶液I、II、III后,依次出現(xiàn)溶液渾濁、溶液漸漸澄清、出現(xiàn)大量絮狀沉淀三種現(xiàn)象。
據(jù)此推測(cè),下列說(shuō)法正確的是()
A.溶液I為等滲溶液,含有Tris緩沖液和EDTA/主要作用是重懸菌體和防止DNA降解
B.溶液II為裂解液,在SDS和NaOH的聯(lián)合作用下裂解細(xì)胞,同時(shí)另DNA變性,便于之后沉淀
C.溶液III為酸性溶液,SDS與酸反應(yīng)生成不溶性沉淀,同時(shí)沉淀被SDS結(jié)合的基因組DNA
D.溶液III中的酸主要作用是與堿中和,使蛋白質(zhì)達(dá)到等電點(diǎn)而沉淀析出
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A.樣品溶解性較差
B.樣品中有不溶顆粒
C.凝膠底部有氣泡
D.鹽離子濃度過(guò)高
E.電極不平衡
A.超聲波破碎能量較大,所以需要間歇性停止,多次反復(fù)
B.溫度差破碎法凍融過(guò)程會(huì)使酶變性,但仍可較好地提取動(dòng)植物細(xì)胞中的糖類物質(zhì)
C.壓力差破碎法因需添加較多低滲物質(zhì),溶劑量大,提取物損失亦大
D.除了溫度差破碎法,另外兩種方法均可提取胞內(nèi)活性蛋白質(zhì)
E.使用壓力差破碎法時(shí),須先用酶解組織成為單細(xì)胞,不然效果較差
A.EcoB
B.HindIII
C.XhoI
D.SmaI
E.BamHI
A.該病原體是桿菌
B.該病原體是革蘭氏染色反應(yīng)呈紫色的細(xì)菌
C.該病原體初次培養(yǎng)的培養(yǎng)基要加入動(dòng)物血清
D.該病原體對(duì)一般消毒劑、殺菌劑的抵抗力不強(qiáng)。對(duì)鏈霉素、卡那霉素及四環(huán)素敏感
A.諾如病毒感染性強(qiáng),以腸道傳播為主,可通過(guò)污染的水源、食物、物品、空氣等傳播,常在社區(qū)、學(xué)校、餐館、醫(yī)院、托兒所、孤老院及軍隊(duì)等處引起集體暴發(fā)
B.該病毒的+RNA直接翻譯成mRNA進(jìn)行翻譯
C.正鏈RNA介導(dǎo)合成負(fù)鏈RNA/負(fù)鏈RNA再介導(dǎo)合成正鏈DNA/負(fù)鏈RNA直接介導(dǎo)合成正鏈DNA
D.直徑約為26~35nm,無(wú)包膜,表面粗糙,球形,呈二十面體對(duì)稱
最新試題
叩頭甲科的幼蟲(chóng)為鉆蛀性害蟲(chóng)。
梨網(wǎng)蝽屬于盲蝽科。
七星瓢蟲(chóng)屬于半翅目。
捕食性昆蟲(chóng)直接捕食導(dǎo)致寄主死亡。
下列不屬于同翅目的昆蟲(chóng)是()
雙翅目是昆蟲(chóng)綱的第二大目。
昆蟲(chóng)是變溫動(dòng)物,環(huán)境溫度對(duì)于昆蟲(chóng)的生長(zhǎng),發(fā)育和繁殖有極大的作用。
蚊、蠅、虻屬于()。
底膜是一層活細(xì)胞。
不同種的昆蟲(chóng)可以從相同深度的土層中找到適合的土溫。