下表中列出幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題。
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在獲得目的基因的過程中，PCR技術(shù)相當重要。PCR擴增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種（）、四種脫氧核苷酸和（）的DNA聚合酶。
此基因與細菌的質(zhì)粒相結(jié)合要依靠（）酶和（）酶，其作用部位是磷酸二酯鍵，然后將目的基因移植到酵母菌體內(nèi)，酵母菌在基因工程中叫（）。
人的基因在牛體內(nèi)能表達，說明人和牛（）。
有人設(shè)想將羊體細胞與牛體細胞進行融合，以獲得新物種“羊一?！?，你認為依據(jù)目前的生物技術(shù)和理論能否實現(xiàn)這一構(gòu)思？你的理由是什么？
圖中的III是導(dǎo)入了目的基因的受體細胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選最終獲得一株有抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析，該植株含有一個攜帶目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1中，仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的（），原因是（）。
導(dǎo)入細菌B細胞的目的基因成功表達的標志是什么？
有人對這種牛奶不敢食用，人們對這種轉(zhuǎn)基因食品的擔心表現(xiàn)在擔心出現(xiàn)（）效應(yīng)，擔心出現(xiàn)新的（），擔心營養(yǎng)成分改變。
若研究發(fā)現(xiàn)羊N細胞中線粒體發(fā)達，故而它的產(chǎn)奶率高，則小羊a會有這一優(yōu)良性狀嗎？你的依據(jù)是什么？
仔鼠出生后可用其尾巴進行DNA檢測，通過（）方法，檢測出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應(yīng)的抗體進行（）雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因（）。
基因工程操作的基本步驟是：①（）；②（）；③（）；④（）。